크로마토그래피(Chromatography) 해결 과제

 

​새로운 소수성1 상호 작용 크로마토그래피 툴 - 처리 시간 단축, 생산성 향상에 기여

 

​단백질과 펩타이드 공학의 발전은 계속 이뤄지고 있으며, 이를 통해 향상된 치료 및 진단 효과가 있는 새로운 바이오의약품의 개발이 가능해졌습니다. 이러한 바이오의약품을 생성하는 공정이 복잡해진 결과, 다운스트림 정제 공정 문제(ex. 불순물의 분리)를 해결하는 것이 제품을 시장에 효과적으로 출시하는 데에 중요한 요소로 자리잡게 되었습니다.

 

 

플랫폼 기반 크로마토그래피 접근법은 단일 항체 제품을 분리하고 정제하는 데는 성공적이였지만, 차세대 바이오의약품은 정제 공정 개발자가 극복해야할 다른 과제들을 수반하였습니다. 제품 및 공정 관련 불순물들은(예: 숙주 단백질, 응집체, 전하 및 글리코실화반응 변이체 등) 계속 발생하며 분리하기가 종종 어렵습니다. 결과적으로, 공정 개발자는 이러한 물질들을 분리하기 위해 혼합 및 다중 모드 크로마토그래피를 연구하고 있습니다. 바이오의약품 종사자들은 HIC(hydrophobic interaction chromatography) 작용기의 선택성을 향상해 업계가 직면한 공정 효율성 문제를 해결하여 결과적으로 수율을 높이고 업스트림 분리 및 정제 공정을 완료하는 시간을 단축하기를 기대하고 있습니다. 

 

선택성 향상을 위한 대체 첨가제 연구

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시토크롬(cytochrome), 미오글로빈(myoglobin), 리소좀(lysozyme) 및 알파-아밀라아제(α-amylase) 분자를 연구하였으며, 여러 AD1 농도를 사용하여 Additive 1(AD1)2이 단백질 분리에 끼친 영향을 비교하였습니다. 그 결과 용출 피크가 AD1 첨가제를 사용하였을 때 첨가제를 사용하지 않았을 때 보다 더 빨리 (40분 이전에) 검출됨을 확인할 수 있었습니다. 가장 좋은 결과는 0.85 M 농도의 첨가제를 사용하였을 때 나타났습니다. 또한 AD1 첨가제를 사용하였을 때 알파-아밀라아제의 공정 효율성에서 가장 뚜렷한 효과가 나타났습니다. HIC 매체에 의한 단백질 분리 인자에 영향을 미치지 않으면서 아밀라아제 체류 인자(retention factor)를 감소시키는 것으로 확인되었습니다. 기존에 첨가제 없이 아밀라아제는 일반적으로 40~50분에 용출 피크를 보였었습니다. 

 

 

 

 

 

 

 

 

저자 소개

 

Dr Nandu Deorkar(PhD, MBA)는 Avantor의 Research and Development의 Vice President입니다. 소재 기술 R&D에서 25년 이상을 종사하면서, Nandu는 화학/고분자 R&D, 신약 개발, 제제, 약물 전달 기술, 공정 개발 및 기술 이전 등 다양한 프로젝트를 이끌었습니다. 인도의 Indian Institute of Technology에서 화학 박사 학위를 받았으며 Fairleigh Dickson University에서 MBA 학위를 받았습니다. 

 

 

Avantor는 분석용 HPLC 및 UHPLC를 포함한 다양한 기술을 바탕으로 고객을 지원합니다. 고객의 응용 분야에 가장 적합한 HPLC 컬럼을 결정하고, 샘플을 준비하고, 최신 소프트웨어 개발을 통해 최신 정보를 얻을 수 있도록 도와드립니다. 당사는 가스 크로마토그래피 제품 및 서비스 포트폴리오를 확대 중입니다. HPLC 및 GC 기기 유지 보수부터 HPLC 분석법 개발 및 교육에 이르기까지 고객의 니즈에 맞는 서비스 솔루션을 제공합니다.

 

 

1. Hydrophobic. 물과 화합되지 않는 성질.
2. 소수성 상호 작용을 유도하기 위해 단백질 표면 또는 크로마토그래피 시약 표면에서 물 분자를 제거하는 특성을 갖는 분자