VWR TEMPase Hot Start DNA Polymerase
제품정보 2020. 12. 23. 17:16 |
PCR에서 DNA polymerase는 template DNA를 기반으로 dNTP의 합성을 촉매하여 DNA 복제에 중요한 역할을 합니다. VWR TEMPase는 민감한 특정 PCR에 적용되는 hot start DNA polymerase입니다. 해당 poylmerase는 TEMPase를 비활성화하는 화학적 성분이 효소에 부착되어, 실온에서도 편리한 reaction 설정이 가능하고 최대 2일 전에 플레이트를 준비할 수 있게 합니다.
높은 수율, 우수한 특이성 및 감도
실온에서 그리고 thermal cycling의 첫 번째 ramp 동안 비활성이기 때문에 비특이적 프라이밍의 형성이 최소화되고 false amplification을 방지합니다. 이는 표준 DNA polymerase와 비교할 때 더 우수한 특이성, 증가된 감도 및 더 큰 수율을 제공합니다.
아래 Figure 1에서 확인하실 수 있는것처럼 TEMPase polymerase는 Taq polymerase 보다 더 높은 특이성과 수율을 보여줍니다.
Figure 2에서는 1 copy of gene도 검출할 수 있는 TEMPase의 높은 감도를 확인 할 수 있습니다.
화학적 비활성 상태의 이점
TEMPase의 화학적 비활성 특징은 매우 유용합니다. TEMPase는 실온에서 뿐만 아니라 첫 번째 thermal ramping에서도 비활성상태입니다. Figure 3에서, TEMPase는 15분동안 95°C에서 가열하면 활성화 됩니다 (lane 1). 가열 과정 없이는 해당 효소는 완전하게 비활성 상태입니다 (lane 2).
Figure 4에서 는 다른 hot start 방법과 비교하여 TEMPase의 우수한 특이성을 확인할 수 있습니다. 화학적으로 비활성화되어있는 효소를 활성화 시키는데는 시간이 걸리지만, 이의 장점이 몇 가지 있습니다. 압타머(Aptamer)와 항체는 DNA 녹는점 이하의 온도에서 이미 효소로부터 분리됩니다. 이는 false priming을 야기할 수 있고 결과적으로 아래 Figure 4에서 보실 수 있듯이 비특이적인 증폭을 초래할 수 있습니다. 하지만 TEMPase는 DNA가 녹고 프라이머가 정확하게 annealing된 후에 활성화 되기 때문에 높은 특이성을 보여줍니다.
제품 스펙
Description | Pk | Cat. No. |
TEMPase Hot Start DNA Polymerase, 5 U/µl, with 10X Key Buffer, 10X Combination Buffer and MgCl2 | 500 EU | 733-1331 |
2500 EU | 733-1333 | |
10000 EU | 733-1838 | |
TEMPase Hot Start DNA Polymerase, Glycerol-free, 5 U/µl, without buffer | 500 Tests | 733-2552 |
GC-Rich DNA Target kit, with TEMPase Hot Start DNA Polymerase, 4X GC Buffers I and II, and 25 mM MgCl2 |
500 Tests | 733-2567 |
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